عدد الرسائل : 1478 العمر : 43 الوظيفة : ************* المؤهل : ************ محل الاقامة : ************ تقيم النشاط : الالتزام بالقوانيين : تاريخ التسجيل : 02/07/2008
موضوع: زراعة العينات لتشخيص الفطريات الأحد 23 نوفمبر - 4:16
في هذا الموضوع سنتكلم إن شاء الله عن جزئين
الجزء الاول
انواع الميديا لزراعة العينة والوقت اللازم لحضن العينة
و درجة الحرارة اللازمة لحضن العينة
الجزء الثاني
طرق فحص المزرعة بعد الحضن
****************
الجزء الأول
أنواع الميديا اللازمة لزراعة الفطريات
بعد أن نكون فحصنا العينة ميكروسكوبيا نحتاج الى زراعة العينة من أجل عزلها
يفضل الانابيب في حالة زراعة الفطريات على الأطياق وذلك لأنها لن تجف مع الوقت الطويل في عملية الحضن
وكذلك لإعطاء فرصة للفطر الموجود فعلا في العينة للنمو والتقليل من التلوث في العينة بفطريات أخرى من الجو
الأطياق لا تستتخدم أبدا إذا توقعنا أن نجد Coccidioides immitisهذا الفطر خطر جدا ويمكن استنشاقه بسهولة
ودائما يجب أخذ احتياطات السلامة عند العمل
**************
Sabouraud dextrose agar SDA
هذا هو الميديا العام للزراعة ال PH=5.6 ولكنه فقير بالمواد الغذائية
هذه الظروف تعمل على منع اي بكتيريا من النمو ولكنها تيمح للملوثات من الفطريات
ولكنها لا تسمح بنمو ال Histoplasma capsulatum وبعض السلالات من ال Nocardia asteroides
المكونات
dextrose 40mg
Neopeptone 10mg
agar 15mg
distilled water 1 liter
التحضير
اخلط جميع المكونات وضعها على النار لتذوب
قسمها في انابيب او اطباق وضعها في التعقيم لمدة 10 دقائق
ضعها بوضع مائل واتركها لتبرد ثم ضعها في الثلاجة
طريقة الزراعة
أولااااااااااا ::ضع الانبوب ليأخذ درجة حرارة الغرفة
ثانيا:::أجزاء من العينة تؤخذ وتزرع في الاجار
ثالثا :::احضنها في الحاضنة لمدة شهر قبل ان تسجل ان النتيجة سلبية
شهد شريف المشرف العام
عدد الرسائل : 1478 العمر : 43 الوظيفة : ************* المؤهل : ************ محل الاقامة : ************ تقيم النشاط : الالتزام بالقوانيين : تاريخ التسجيل : 02/07/2008
موضوع: رد: زراعة العينات لتشخيص الفطريات الأحد 23 نوفمبر - 16:19
Sabourd dextrose agar with cycloheximide and chloramphenicol SDS-C&C
السيكلو هيكسميد والكلورام فينيكول هما مضادان حيويان يمنعان نمو البكتيريا
ومعظم الملوثات من الفطريات وبالتالي يسمحان بنمو الفطريات الممرضة الموجودة بالعينة
يستعمل هذا الميديا لزراعة عينات الجلد الشعر الاظافر التي تنمو بهااو يتوقع وجود ال
Dermatophytesاو الcandida albicans
فهذه الميكروبات لا تمنع هذه المضادات من نموها فبالتالي تنمو عليه
المكونات
dextrose 40mg
neopeptone 10mg
agar 15mg
distilled water 1 liter
cyclohexamide 500mg
acetone 10ml
chloramphenicol 50mg
95% alcohol 10mg
التحضير
اخلط اول اربع مكونات مع بعضهما ثم
اذب السيكلوهسيدين في الاسيتون والكلورام فينكول في الكحول
اضف الاثنين الى الميديا واخلطهما جيداااااااااااااااااااااااا
قسم الميديا في انابيب وضعها في الاوتوكليف لمدة 10 دقائق
ثم بردهاااااااااااااااا وضعها في الثلاجة
العمل
اولااااااااااااا:::اترك الميديا تاخذ درجة حرارة الغرفة
ثانياااااااا:::::::اعمل مسحة داخل الاجار
ثالثااااااا::::: احضن العينة لمدة شهر قبل ان تسجل النتيجة سلبية
شهد شريف المشرف العام
عدد الرسائل : 1478 العمر : 43 الوظيفة : ************* المؤهل : ************ محل الاقامة : ************ تقيم النشاط : الالتزام بالقوانيين : تاريخ التسجيل : 02/07/2008
موضوع: رد: زراعة العينات لتشخيص الفطريات الأحد 23 نوفمبر - 16:47
Brain heart infusion agar with blood BHIAB
هذا الميديا يحوي مواد غذائية جيدة واضافة الدم اليه تجعله غنيا بها اكثر
في وجود الاوكسجين البكتيريا والفطريات الممرضة والملوثة تنموجيدا عليه جميعها
واهذا فهو الى درجة محدودة غير مجدي بوجود الاوكسجين
لكن قيمته بوجود الاوكسجين تكمن في عزل ال Histoplasma capsulatum و ال Nocardia
من عينات معقمة جيدا وكذلك لتحويل الفطريات الDimorphic من فطر الى خميرة
يحضن الميديا في اجواء عديمة الاوكسجين اذا توقعنا وجود ال Actinomycetes
المكونات
brain heart infusion 37mg
distilled water 1 liter
agar 20mg
sheep blood defibrenated sterile 100mg
التحضير
اخلط جميع المكونات معااااااا الا الدم ضعها في الاوتوكليف لمدة 15 دقيقة
ثم بردها على درجة حرارة 50 مئوية
اثناء التفاف الاناء الموضوع فيه الميديا اضف الدم ثم صبه حالا داخل الاطباق او قسمه اجزاء في الانابيب
يتبع ان شاء الله
محمد أحمد محمد عضو جديد
عدد الرسائل : 6 العمر : 43 الوظيفة : لا يعمل المؤهل : بكالويوس علوم محل الاقامة : البحيرة تقيم النشاط : الالتزام بالقوانيين : تاريخ التسجيل : 07/01/2008
موضوع: رد: زراعة العينات لتشخيص الفطريات الجمعة 12 ديسمبر - 14:49
عرض ممتاز شكرا
Ahmad Yossif مشرف قسم فحص الأنسجة الباثولوجية والأورام
عدد الرسائل : 2149 العمر : 38 الوظيفة : tecqhnesion in medical lab المؤهل : phd محل الاقامة : pelastine تقيم النشاط : الالتزام بالقوانيين : تاريخ التسجيل : 22/04/2008
موضوع: رد: زراعة العينات لتشخيص الفطريات الجمعة 12 ديسمبر - 18:32
جزاكي الله خير دكتورة شهد
شهد شريف المشرف العام
عدد الرسائل : 1478 العمر : 43 الوظيفة : ************* المؤهل : ************ محل الاقامة : ************ تقيم النشاط : الالتزام بالقوانيين : تاريخ التسجيل : 02/07/2008
موضوع: رد: زراعة العينات لتشخيص الفطريات الأحد 14 ديسمبر - 5:10
شكرا لمروركم الكريم دكتور/ محمد احمد محمد
ودكتور / احمد يوسف شكرا لكما
*******************
استكمالاً للموضوع فأن هناك نوعاً اخر من الميديا هو
Brain heart infusin media with cyclohexamide, and chloramphencol
BHIAB-C&C
كنا قد قلنا أن BHIAB بوجود الاوكسجين تكمن في عزل ال Histoplasma capsulatum و ال Nocardia
ووجود المضادات الحيوية هنا يمنع نمو البكتيريا او الفطريات الاخرى التي تلوث العينة من الجو
بما فيها ال Nocardia asteriods
************
المكونات
brain heart infusion 37mg
distilled water 1 liter
agar 20mg
sheep blood defibrenated sterile 100mg
cyclohexamide 500mg
acetone 10ml
chloramphenicol 50ml
95%alcohol 10ml
********************* التحضير
اولا : اخلط المواد الثلاثة الاولى معا واجعلها تغلي
ثانيا: اذب السيكلوهسمايد في الاسيتون والكلورام فينكول في الكحول
ثم اضفهما على الميديا الغالي واخلطهما جيد
ثالثا: ضع الميديا في الاوتوكليف على 15 psi لمدة 15 دقيقة ثم برد على درجة 50 سيلسيوس اثناء تحريك الاناء ضف الدم وقسم الميديا فورا الى اجزاء في تيوبات سلانت برد وفرز
************
طريقة العمل
اجعل الميديا يأخذ درجة حرارة الغرفة ادخل سواب الى السلانت احضن لمدة شهر على درجة 30 سيلسيوس قبل ان تسجل الفحص سلبي
وهكذا نكون قد انهينا انواع الميديا بأذن الله
************************
ولكن قبل ان ننهي الموضوع هناك نقطتين يجب التطرق لهما أولا
وقت الحضن
بعض الفطريات تنمو خلال 3 الى 4 ايام وبعضها يحتاج الى 4 اسابيع
هذه المعدلات في النمو تختلف حسب نوع الميديا ودرجة الحرارة والمثبطات في عينة الشخص
ولكن للتقليل من الخطأ بالنتيجة السلبية احفظ العينة لمدة شهر قبل ان تبلغ عنها انها سلبية
العينات التي تتوقع وجودHistoplasma capsulatum فيها احفظها لمدة ثلاثة اشهر
______________________________
النقطة الاخرى هي
درجة حرارة الحضن
بشكل عام الفطريات تحتاج الى درجة حرارة 30 سيلسيوس
ودرجة حرارة الغرفة ايضا 25سيلسيوس مقبولة ايضا
الحضن على درجة 37 سلسيوس من الممكن ان يمنع نمو بعض الانواع من الفطريات
ولان ال dimorphic fungi تتحول ومن الافضل عزلها كفطر وليس كخميرة
ولكن بالنسبة لل actinomycetes دائما يجب زرعها على درجة حرارة 37 مئوية
****************
وان شاء الله نستكمل طرق فحص الفطريات بعد الزراعة في موضوع اخر وذلك للتفرقة فقط
sama عضو
عدد الرسائل : 59 العمر : 39 الوظيفة : اخصائيه تحاليل طبيه المؤهل : بكالوريوس علوم + دبلوما الفيسيولوجى والكيمياء الحيويه+ تمهيدي ميكروبيولوجي محل الاقامة : الدقهليه تقيم النشاط : الالتزام بالقوانيين : تاريخ التسجيل : 24/11/2007
موضوع: رد: زراعة العينات لتشخيص الفطريات الإثنين 2 مارس - 1:43
اشكرك جدا يا دكتوره شهد ........... انا كنت محتاجه الموضوع ده جدا ولقيت فيه اللي انا عايزاه...لان انا شغل الماجستير بتاعي في الفطريات وبحاول اجمع حاجات عن الشغل العملي قبل ماابدا...وياريت الموضوع يكون متجدد ويكون فيه موضوعات جميله زي دي لاني انا عمري ماشتغلت اي شغل عملي بس بحاول اتعلم من المنتدي......
انا بس نفسي تعملي موضوع عن زراعه عينات الsputum وكيفيه عزل فطريات ممرضه منها....شكرا جدااااااااااا
دكتور نواف سليمان العبدلي مشرف قسم الحبيب محمد صلى الله عليه وسلم
عدد الرسائل : 1043 العمر : 44 الوظيفة : طبيب المؤهل : طبيب ممارس محل الاقامة : موصل_عراق تقيم النشاط : الالتزام بالقوانيين : تاريخ التسجيل : 24/11/2007
موضوع: رد: زراعة العينات لتشخيص الفطريات الخميس 5 مارس - 17:05
جزاكي الله خيرا دكتورة شهد
al-lol عضو
عدد الرسائل : 10 العمر : 59 الوظيفة : Lab Manager المؤهل : ماجستير كيمياء حيوية محل الاقامة : الاسكندرية تقيم النشاط : الالتزام بالقوانيين : تاريخ التسجيل : 06/04/2009
موضوع: رد: زراعة العينات لتشخيص الفطريات الأحد 17 مايو - 16:38